Enrique era el medio hermano de Isabel, hijo de Juan II, el padre de Isabel, y Maria de Aragón. Nacido el 5 de enero de 1425 en la ya desaperecida Casa de las Aldabas en la calle Teresa Gil en Valladolid, fallecido en la noche del 11 al 12 de diciembre de 1474 en Madrid, posiblemente por envenamiento.
Juana nació el 28 de febrero 1462 en Madrid como Juana de Castilla, hija de la reina Juana de Portugal y el rey Enrique IV. Falleció el 12 de abril 1530 en Lisboa. Rival de Isabel en cuanto a de la sucesión al trono.
Pacheco (1419 – 1474), también conocido como el marqués de Villena, fue uno de los nobles más importantes en la corte de Castilla. Creció junto con Enrique, el futuro rey Enrique IV. Más tarde, entró en conflicto con Enrique porque fue pasado por alto en favor de Beltrán de la Cueva.
Alfonso (1453 – 1468) fue el hermano menor de Isabel. También conocido con el nombre de Alfonso el Inocente. Se convirtió en rey cuando tenía once años de edad. Murió a los catorce años.